适用范围

维生素B12(钴胺素)检测试剂盒适用于奶粉中添加维生素B12（VB12）含量的定量分析。该试剂盒可进行96次测定。

实验原理

维生素B12(钴胺素)检测试剂盒采用微生物方法定量检测奶粉中添加VB12的含量。微生物检测体系与国际规范保持一致。德氏乳杆菌的生长离不开VB12，其生长强度与样品中VB12的含量有关，将已加入德氏乳杆菌的VB12检测培养基、样品或标品加入到微孔中，37°C避光孵育，德氏乳杆菌开始生长直至VB12被完全消耗，44-48小时完成孵育。采用酶标仪读取610-630nm或540-550nm下样品的浑浊度，将样品浊度与标准曲线对比即可得到样品中VB12的含量。

更多产品如下：

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平 衡 30min 以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。 

2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于 2～8℃。切勿 冷冻。 

3、洗涤液在使用前也需回温。 

4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标 准品做 2 孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。 

5、加标准品/样本：加标准品/样本 50μL 到对应的微孔中，然 后加入 VB12抗试剂 50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖 板后置 25℃避光环境中反应 30min。 

6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液 250μL/ 孔，充分洗涤 4~5 次，每次间隔 10s，用吸水纸拍干（拍 干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。 

7、加酶标物：加入 VB12酶标物 100μL/孔，轻轻振荡混匀， 用盖板膜盖板后置 25℃避光环境中反应 15min，取出重复 洗板步骤 6。 

8、显色：加入底物液 A 液 50μL/孔，再加底物液 B 液 50μL/ 孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应 15min。 

9、测定：加入终止液 50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪 于 450nm 处（建议用双波长 450/630nm 检测，请在 5min 内读完数据），测定每孔 OD 值。