本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，与仪器分析技术相比，具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点，操作时间为45min，能减少操作误差和工作强度。

试验原理

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被四环素类药物抗原，样本残留的四环素类药物和微孔条上预包被的抗原竞争抗四环素类药物抗体（抗试剂），加入酶标二抗（酶标物），经TMB底物显色，样本吸光度值与其残留物四环素类药物呈负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中四环素类药物的含量。

适用范围

可定性、定量检测蜂蜜、牛奶中四环素、土霉素、金霉素、强力霉素等四环素类药物的含量。

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20~25°C）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。若试剂中有晶体析出，回温溶解后方可使用。

2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔放入锡箔袋，保存于2~8°C。切勿冷冻。

3、洗涤工作液在使用前也需回温。

4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本：加标准品/样本100μL到对应的微孔中，再加入四环素类酶标物50μL/孔，再加入四环素类抗试剂50μL/孔轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25°C避光环境中反应30min。

6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液250μL/孔，充分洗涤4~5次，每次间隔10s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。

7、显色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25°C避光环境反应15min。

8、测定：加入终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，请在5min内读完数据），测定每孔OD值。

结果判定

请利用试剂盒专业分析软件进行计算，更便于大量样本的准确、快速分析（欢迎来电索取）。