试剂盒
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四环素类(TCs)ELISA检测试剂盒

检测项目:抗生素

适用样本:动物组织、鸡蛋、猪尿等样本

规格
96T
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产品介绍
概述

本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点,操作时间需45min,能减少操作误差和工作强度。

检测步骤

1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。若试剂中有晶体析出,回温溶解后方可使用。

2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔放入锡箔袋,保存于2~8℃。

3、洗涤液【配液1】在使用前也需回温。

4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本:加标准品或样本100μL/孔到对应的微孔中,然后加入四环素类酶标物50μL/孔,再加入四环素类抗试剂50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于25℃避光环境中反应30min。

6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液【配液1】250μL/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。

7、显色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于25℃避光环境反应15min。

8、测定:加入终止液50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值。(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。


注意事项
1、室温低于 20℃或试剂及样本没有回到室温(20~25℃),会导致所有标准的 OD 值偏低。 2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。 3、每加一种试剂前需将其摇匀。 4、反应终止液为 2M 硫酸,避免接触皮肤。 5、不要使用过了有效日期的试剂盒,也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂;掺杂使用过了有效期的试剂盒会导致灵敏度降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。 6、储存条件保存试剂盒于 2~8℃,切勿冷冻,将不用的酶标板微孔板放进锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。 7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0 标准的吸光度(450/630nm)值小于 0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。 8、在加入底物液A 液和底物液 B 液后,一般显色时间为15min。若颜色较浅,可延长反应时间到 20min,但不得超过 20min。反之,则减短反应时间。 9、浓缩洗涤液如有结晶属正常现象,请加热溶解后使用。 10、该试剂盒最佳反应温度为 25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
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