2024-05-16 17:29浏览量:100
磺胺类快速检测卡采用了荧光侧向免疫层析(Fluorescent Lateral Flow,FLF)方法学原理,这是一种结合了免疫学和色谱技术的检测方法。
下面我将详细解释其工作原理:
样品与抗体的结合:当将待测样品滴加在试纸条的加样区时,样品中的磺胺类分子会与结合垫中的荧光微球标记磺胺类抗体发生特异性结合。这种结合是通过磺胺类分子与磺胺类抗体之间的抗原-抗体反应实现的。
毛细作用下的层析:结合后的磺胺类分子-荧光微球标记抗体复合物在毛细作用下向前移动,经过试纸条上的层析材料。层析材料通常是一种具有多孔结构的载体,它能够使样品中的不同组分按照一定的速率分离和迁移。
抗原-抗体结合反应:当复合物移动到检测区(T线)时,检测线上固定的磺胺类抗原会与剩余未结合的荧光微球标记磺胺类抗体结合,形成抗原-抗体复合物。这个过程中,荧光微球作为信号标记物,使得复合物能够被荧光读数仪检测到。
荧光信号与磺胺类浓度的关系:检测线T线上结合的荧光微球标记磺胺类抗体的量与样品中磺胺类的浓度成反比。也就是说,当样品中磺胺类的浓度较高时,更多的磺胺类分子会与抗体结合,导致检测线上结合的荧光微球标记抗体减少,荧光信号减弱。相反,当磺胺类浓度较低时,检测线上的荧光信号会相对较强。
荧光读数仪的读取与计算:层析结束后,使用荧光读数仪分别读取T线和C线(质控线)的荧光强度。质控线的荧光强度用于验证检测过程的有效性。然后,通过计算T/C值(即检测线与质控线荧光强度的比值),结合仪器内置的标准曲线,即可计算出样品中磺胺类的含量。
阴阳性的判断:根据计算出的磺胺类含量与预设的阈值进行比较,可以判断样品是否呈阳性(即含有磺胺类)或阴性(不含磺胺类)。
磺胺类荧光定量快速检测卡主要适用于快速定量检测各类样品中磺胺类的残留浓度。具体来说,其适用范围包括但不限于以下几个方面:
乳品:检测乳品中的磺胺类残留,确保乳品质量安全。
畜禽、水产:适用于畜禽肌肉、肝脏、鱼肉、虾肉等组织中的磺胺类药物残留筛查,保障畜禽和水产品的食品安全。
蜂蜜、饲料:同样可用于检测蜂蜜和饲料中的磺胺类残留,确保这些产品的安全和合规性。
这种磺胺类荧光定量快速检测试纸条具有操作简便、快速、灵敏度高和特异性强的优点,广泛应用于食品安全、环境监测和药物残留检测等领域。
磺胺类荧光定量快速检测卡的检测流程通常包括以下步骤:
准备阶段:
完整阅读使用说明书,确保了解所有操作步骤和注意事项。
将未开封的检测卡和待检样本溶液回复至常温。
加样:
从包装袋中取出检测卡后尽快使用。
将检测卡平放,用滴管吸取待检样品溶液,垂直滴加3~4滴(根据具体说明书的指导量)于加样孔中。
计时与等待:
加样后开始计时,等待层析反应发生。
读取结果:
结果应在规定的时间内读取,通常为5~10分钟。超过15分钟后判读可能无效。
读取结果时,检测卡应水平置于观察者正面。
观察检测卡上的T线(测试线)和C线(质控线)的显色情况。
结果判断:
阴性(-):T线显色,表明样品中磺胺类浓度低于检测限或不含磺胺类残留。
阳性(+):T线无显色或颜色极浅,表明样品中磺胺类浓度高于检测限。
无效:未出现C线,可能操作不当或检测卡已失效。在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的检测卡重新测试。
记录与报告:
记录检测结果,并根据需要打印或保存检测报告。
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