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喹乙醇代谢物ELISA检测试剂盒原理

2024-07-08 16:12浏览量:20

喹乙醇代谢物ELISA检测试剂盒的原理主要基于竞争ELISA方法,具体步骤如下:

喹乙醇代谢物ELISA检测试剂盒基本原理

ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种常用的免疫学检测方法,其基本原理是将抗原或抗体吸附在固相载体表面,然后加入酶标二抗,最后通过底物显色反应,根据颜色变化来检测抗原-抗体反应的存在。在喹乙醇代谢物ELISA检测试剂盒中,这一原理被应用于检测样本中的喹乙醇代谢物。

喹乙醇代谢物ELISA检测试剂盒具体原理

  1. 包被抗原:在酶标板微孔上预包被喹乙醇代谢物抗原。这是检测的基础,为后续的抗原-抗体反应提供了固定的反应位点。

  2. 竞争反应:检测时,加入标准品或样品溶液,喹乙醇代谢物抗体及酶标记物。样本中残留的喹乙醇代谢物和预包被的喹乙醇代谢物抗原竞争性地与喹乙醇代谢物抗体结合。这一步骤是竞争ELISA方法的核心,通过竞争反应来定量样本中的喹乙醇代谢物含量。

  3. 酶联反应:加入酶标二抗后,酶标二抗能够与已经与抗原结合的抗体结合,形成酶标抗原-抗体复合物。这一步骤进一步放大了抗原-抗体反应的信号。

  4. 底物显色反应:在加入TMB(四甲基联苯胺)等底物后,酶标抗原-抗体复合物与底物发生显色反应,产生颜色变化。显色反应的强度与样本中喹乙醇代谢物的含量成反比,即样本中喹乙醇代谢物含量越高,显色反应越弱;反之,则越强。

  5. 终止反应与检测:显色反应持续一定时间后,加入反应终止液以停止显色反应。终止液一般是酸或碱溶液,可以使酶失活。随后,在450nm波长酶标仪下检测各孔的光密度值(OD值)。通过标准曲线可以得出样本中喹乙醇代谢物的浓度。标准曲线是通过检测已知浓度的标准品绘制而成的,用于将OD值转换为具体的浓度值。


喹乙醇代谢物ELISA检测试剂盒利用竞争ELISA方法,通过包被抗原、竞争反应、酶联反应、底物显色反应和终止反应等步骤,快速、准确地检测样本中的喹乙醇代谢物含量。该试剂盒具有灵敏度高、操作简便、结果可靠等优点,广泛应用于食品安全检测等领域。