红亮诱人的辣椒粉，是餐桌上不可或缺的风味担当。但这份“红”的背后，却可能潜藏着苏丹红的安全隐患。作为明令禁止在食品中添加的工业染料，苏丹红的精准检测，始终是食品安全领域的重点课题。

然而辣椒粉基质复杂，传统国标法或专用小柱检测常陷入“杂质围城”。

如何突破这一检测瓶颈？本研究通过固相萃取结合高效液相色谱，创新性在苏丹红专用柱前增加预处理柱，双重净化，显著吸附辣椒粉中共存杂质，使苏丹红检出更纯净、更准确，为辣椒制品安全检测提供可靠新路径！

实验部分

摘要：

本实验采用固相萃取结合高效液相色谱建立了辣椒粉中苏丹红的前处理方法。辣椒粉样品复杂，使用国标法或市面苏丹红专用小柱方法，会出现谱图杂质多，影响苏丹红定量现象。本实验优化了苏丹红专用小柱的方法，在专用柱基础上添加了预处理柱，可大量吸附辣椒粉中干扰测定的杂质，再经过 SDR-2 小柱对苏丹红进行富集，可解决辣椒粉杂质干扰苏丹红出峰的问题。样品经乙酸乙酯提取，预处理柱结合 SDR-2 固相萃取柱净化，高效液相色谱检测，外标法进行定量。结果表明，苏丹红为 1 mg/kg 时，四种苏丹红的回收率均在 90% ~ 105%，能够满足检测要求。 

关键词：苏丹红；预处理柱；SDR-2固相萃取小柱；辣椒粉。

样品信息

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

高效液相色谱仪-PDA检测器（HPLC-PDA）。

试剂材料

• 乙腈、乙酸乙酯、正己烷均为色谱纯；

• 30%乙酸乙酯/正己烷溶液：取 30 mL 乙酸乙酯，加入 70 mL 正己烷，混匀；

• 苏丹红混合标准工作溶液：乙腈稀释；

• PuriTest SDR-2 固相萃取小柱：500 mg/6 mL，P/N：CSS0187；

• 预处理柱：P/N：CSS0187-Y。

样品制备

样品提取 

称取 2 g 样品置于 50 mL 离心管中，加入 20 mL 乙酸乙酯，涡旋混合 3 min，超声提取 10 min，8000 rpm 离心 5 min，转移上清液至 15 mL 离心管中，残渣中加入 20 mL 乙酸乙酯重复提取一次，合并两次提取液，用乙酸乙酯定容至 40 mL，摇匀。准确移取 10 mL 提取液于 40℃ 氮吹干，加入 5 mL 正己烷复溶，涡旋混匀，待净化。

样品净化

将预处理柱和 SDR-2 小柱用 5 mL 正己烷活化，然后将预处理柱串联在 SDR-2 小柱上方，将待净化液全部上样于小柱中，并弃去流出液，用 5 mL 正己烷清洗样品管，并将清洗液一并上到小柱上，弃去流出液。将预处理柱弃去，用10 mL 30%乙酸乙酯/正己烷溶液（V/V）洗脱 SDR-2 小柱，收集流出液于40 摄氏度氮吹干，用 1 mL 乙腈复溶，涡旋混匀，过 0.45 μm 亲水PTFE 针式过滤器（P/N：MZ081345）过滤，待检测。

注：上样时需要控制预处理柱流速在 2 - 3 s/滴，流速过快会导致回收率偏低。

色谱条件

• 色谱柱：Robussil C18，5 μm，4.6 ×250 mm（P/N：CSH952505）；

• 流动相：水∶乙腈 = 3∶97；

• 进样量：20 µL；

• 检测波长：478 nm；

• 流速：1 mL/min 

注：辣椒粉基质比较复杂，杂质容易在色谱柱上堆积，测试大批量样品后，易造成保留时间漂移，建议定期用异丙醇冲洗色谱柱，以延长色谱柱寿命。

实验结果及讨论

由表 1、图 2 可知，使用 PuriTest SDR-2 结合预处理小柱净化辣椒粉样品，净化效果良好，且加标回收率均在 80% ~ 120%之间，能够满足检测要求。有图 1 ~ 图 3 可知，使用 Robussil C18 色谱柱分离苏丹红，分离度良好，且保留时间稳定。能够解决杂质峰过多导致的苏丹红无法定量或定量不准确的问题。

实验谱图

结论

本实验通过对前处理方法的优化，建立了辣椒粉中苏丹红的前处理方法。使用 PuriTest  SDR-2 产品串联预处理柱并结合高效液相色谱对 1 mg/kg 添加水平的辣椒粉样品进行了检测，回收率在90% ~ 110%之间，RSD 小于 10%，能够满足检测要求。增加了预处理柱后，能够将辣椒粉样品中的杂质吸附干净，不再对苏丹红的出峰造成干扰。说明 PuriTest SDR 串联预处理柱能够用于辣椒粉中苏丹红的检测。

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