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呕吐毒素ELISA快速检测试剂盒

检测项目:真菌毒素

适用样本:饲料、饲料原料、粮油

规格
96T/盒
咨询购买 浏览量:1800
产品介绍
概述

概要 

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DeoxynivaLenoL)又称呕吐毒素 (Vomitoxin)属于霉菌的单端孢菌素族,由某些镰刀霉真菌属产生。呕吐毒素多分布于小麦、大麦、玉米等谷物籽实样本中,由于其具有强的细胞毒性及免疫抑制性质,对人类及动物的健康构成威胁。 

本试剂盒是应用ELISA最新技术研发而成的毒素检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点,操作时间需20min,能减少工作强度和操作误差。 


实验原理 

本试剂盒采用间接竞争ELISA 方法,在酶标板微孔上预包被呕吐毒素抗原,样本中的呕吐毒素和微孔上预包被的抗 原竞争呕吐毒素抗体(抗试剂),同时呕吐毒素抗体与酶标二抗(酶标物)相结合,经TMB 底物显色,样本吸光度值与其所含呕吐毒素含量呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的校准系数,即可得出样本中呕吐毒素的含量。 


贮藏条件及有效期 

贮藏条件:保存试剂盒于 2~8℃。 

有效期:该产品有效期为 12 个月。

检测步骤

1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平 衡 1h 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。 

2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于 2~8℃。切 勿冷冻。 

3、洗涤液在使用前也需回温。 

4、请注意反应温度不宜过高,控制温度在 20~25℃。 

5、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标 准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置(建 议在一次实验过程中,若使用 8 道移液器则标准品和样本 的总量不宜超过 48 个,即不宜超过 6 个检测条;建议若 使用单道移液器则不宜超过 16 个,即不宜超过 2 个检测 条)。 

6、加标准品/样本:加入标准品或样本 50μL 到对应的微孔中, 加酶标物 50μL /孔,再加入抗试剂 50μL /孔(加抗试剂时 请使用多道移液器),轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置 25℃避光环境中反应 15min。 

7、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液 250μL /孔,充分洗涤 4~5 次,每次间隔 10s,在吸水纸上拍干(拍 干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。 

8、显色:加入底物液 100μL /孔(加底物液时请使用多道移 液器),用盖板膜盖板后置 25℃避光环境反应 5min。 

9、测定:加入终止液 50μL /孔(加终止液时请使用多道移液 器),轻轻振荡混匀,设定酶标仪于 450nm 处(建议用 双波长 450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据),测定 每孔 OD 值。

注意事项
1. 试剂及样本没有回到室温(20~25℃)会导致所有标准的 OD 值偏低。 2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲 线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即 进行下一步操作。 3. 每加一种试剂前需将其摇匀。 4. 反应终止液为 2M 硫酸,避免接触皮肤。 5. 不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期 的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会 引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试 剂。 6.储存条件:保存试剂盒于 2~8℃,不要冷冻,将不用的酶标板微孔板 放进锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。 7. 试剂变质的迹象:发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0 标准 的吸光度(450/630nm)值小于 0.5(A450nm<0.5)时,表示 试剂可能变质。 8. 加入底物液后,一般显色时间为 5min。若颜色较浅,可延长反应时间到 7min。反之,则减短反应时间。 9. 浓缩洗涤液如有结晶属正常现象,请加热溶解后使用。 10. 该方法为筛选方法,如遇阳性样本请用确证方法确认。 11. 该试剂盒最佳反应温度为 25℃,温度过高或过低将导致 检测吸光度值和灵敏度发生变化。
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