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地克珠利ELISA检测试剂盒原理以及注意事项

2024-05-15 14:59浏览量:40

地克珠利ELISA检测试剂盒是一种用于检测地克珠利残留量的试剂盒,采用了酶联免疫吸附法(ELISA)原理。这种试剂盒具有特异性强、准确性高、快速简便等优点,可定性、定量检测动物鸡肉、饲料样本中地克珠利的含量


地克珠利是一种新型、高效、低毒的抗球虫药,广泛用于鸡球虫病的治疗。然而,由于其在动物体内的代谢和排泄,可能会对环境和人体健康造成潜在危害。因此,对地克珠利残留量的检测具有重要的意义。


地克珠利ELISA检测试剂盒的操作步骤一般包括以下几个步骤:

1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平 衡 30min 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。 

2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿 冷冻。 

3、洗涤液在使用前也需回温。 

4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标 准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。 

5、加标准品/样本:加入标准品或样本 50μL 到对应的微孔中, 再加入地克珠利酶标物 50μL/孔,再加入地克珠利抗试剂 50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境 中反应 30min。 6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液 250μL/ 孔,充分洗涤 4~5 次,每次间隔 10s,用吸水纸拍干(拍 干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。

7、显色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加底物液 B 液 50μL/ 孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应 15min。 

8、测定:加入终止液 50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪 于 450nm 处(建议用双波长 450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据),测定每孔 OD 值(若无酶标仪,则不加终 止液用目测法可进行判定)


地克珠利ELISA检测试剂盒在使用时需要注意以下事项:

  1. 严格遵循说明书:务必按照试剂盒附带的说明书严格操作,不得随意更改实验步骤和条件。

  2. 样本准备:样本采集和处理应按照说明书规定进行,确保样本的新鲜、无污染,并避免反复冻融。

  3. 试剂保存:所有试剂在使用前都应达到室温,并避免阳光直射和高温。未使用的试剂应存放在推荐的温度下,并遵循保存期限。

  4. 操作时间:注意加样和孵育的时间,过长或过短的时间都可能影响检测结果的准确性。

  5. 加样准确性:使用加样器时要准确、迅速,避免加样过程中的交叉污染和气泡产生。

  6. 洗涤步骤:洗涤过程应充分且彻底,避免未结合的试剂残留在微孔板上,影响实验结果。

  7. 显色与测定:显色剂应在临用前配制,并避免长时间暴露于空气中。测定时应使用酶标仪,确保读数准确。

  8. 安全防护:地克珠利可能对人体健康有潜在影响,因此操作时应佩戴手套、护目镜等防护设备,避免直接接触试剂。

  9. 废物处理:实验后产生的废弃物应按照实验室废弃物处理规定进行妥善处理,避免对环境造成污染。

  10. 质量控制:每次实验都应包括质控品,以监测实验的准确性和可靠性。

  11. 记录与解读:实验过程中应详细记录每一步骤和结果,以便后续分析和解读。解读结果时应结合质控品的结果进行综合考虑。