新霉素介绍

新霉素为氨基糖甙类抗生素的一种，对革兰氏阴性菌具有较强的抑制作用，所以临床上广泛应用。由于新霉素具有耳毒性和肾毒性，因此我国农业部规定了新霉素的最高残留限量。 本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点，能减少操作误差和工作强度。

新霉素Elisa试剂盒原理

新霉素Elisa快速检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被新 霉素抗原，样本残留的新霉素和微孔条上预包被的抗原竞争抗新霉素的抗体，加入酶标二抗，经 TMB 底物显色，样本吸光 度值与其残留物新霉素呈负相关，与标准曲线比较再乘以其对 应的稀释倍数，即可得出样本中新霉素的含量。

新霉素Elisa试剂盒适用范围 

可定性、定量检测动物组织中新霉素的含量。

新霉素Elisa试剂盒检测步骤 

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20~25℃）平 衡 30min 以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。若试 剂中有晶体析出，回温溶解后方可使用。 

2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔放入锡箔袋，保存 于 2~8℃。 

3、洗涤液在使用前也需回温。 

4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做 2 孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。 

5、加标准品/样本：加标准品或样本50μL 到对应的微孔中， 然后加入新霉素酶标物 50μL/孔，再加入新霉素抗试剂 50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应 30min。 

6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液250μL/ 孔，充分洗涤 4~5 次，每次间隔10s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。 

7、显色：加入底物液 A 液 50μL/孔，再加入底物液 B 液 50μL/ 孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置 25℃，避光环境中反应 15min。 

8、测定：加入终止液 50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm 处（建议用双波长 450/630nm 检测，请在 5min 内读完数据），测定每孔 OD 值（若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定）。

新霉素Elisa试剂盒注意事项 

1、室温低于 20℃或试剂及样本没有回到室温（20~25℃）会导 致所有标准的 OD 值偏低。 

2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行 下一步操作。 

3、每加一种试剂前需将其摇匀。 

4、反应终止液为 2M 硫酸，避免接触皮肤。 

5、不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。 

6、储存条件：保存试剂盒于 2~8℃，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。 

7、试剂变质的迹象：底物液有任何颜色表明底物液变质，应当 弃之。0 标准的吸光度（450/630nm）值小于 0.5（A450nm<0.5） 时，表示试剂可能变质。 

8、加入底物液 A 液和底物液 B 液后，一般显色时间为 15min 即可。若颜色较浅，可延长反应时间到 20min。反之，则减短反应时间。 

9、浓缩洗涤液如有结晶属正常现象，请加热溶解后使用。 

10、该试剂盒最佳反应温度为 25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。

贮藏条件及有效期

贮藏条件：保存试剂盒于 2~8℃。

有效期：该产品有效期为 12 个月。