概要 

L-羟脯氨酸是胶原蛋白（皮革水解蛋白）特有的氨基酸， 皮革水解蛋白是利用皮革下脚料，经水解而生成的一种粉状物， 其本身对人体健康无害，但若使用经鞣制、染色等手段处理过 的皮革制备的“蛋白粉”则会混进大量的重铬酸钾和重铬酸 钠等有毒物质，若长期食用含这种“皮革水解蛋白粉”的食 物，会对人体健康产生严重危害。因此国家禁止在乳及乳制品 中添加皮革水解蛋白。 由于牛奶中并不含此氨基酸，所以一般乳与乳制品中是否 掺有皮革水解蛋白可通过检测 L-羟脯氨酸来鉴定。本公司开 发的 L-羟脯氨酸检测试剂盒可特异性检测牛奶中的羟脯氨酸 的含量。

实验原理及范围 

样本经水解后释放出 L-羟脯氨酸，L-羟脯氨酸经活化剂活 化后，会与底物液反应呈现出特有的颜色，与标准曲线对比后， 再乘以其相应的稀释倍数，即可得出样本中 L-羟脯氨酸的含量。 

适用范围 

可定量检测成品奶、生鲜奶、奶粉中 L-羟脯氨酸的含量。

溶液的配制 

具体操作请参考说明书

检测步骤 

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20~25℃）平 衡 30min 以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。 

2、取出需要数量的微孔板。 

3、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标 准品做 2 孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。 

4、加标准品/样本：向微孔板中加入 100μL 标准品/样本。 

5、加活化剂即用液：向标准品及样本微孔中加入 75μL 活化 剂即用液，并充分混匀，盖上盖板膜，室温避光条件下孵 育 5min。

6、显色：向标准品及样本微孔中加入 75μL 底物即用液，轻 微振荡混匀，盖上盖板膜，于 70℃烘箱孵育 30min。 

7、测量：于波长 550 或 560nm 下测定，请在 10 min 内读完 数据。

结果判定

使用 4 参数方法（4p）构建标准曲线，从标准曲线中读 出稀释后样本中 L-羟脯氨酸的浓度，再乘以其相应的稀释倍 数即可得到样本中 L-羟脯氨酸的含量。