概要
林可霉素属于林可胺类窄谱抗生素,能抑制细菌蛋白质的 合成,细菌对本品以及其他大环内酯类抗菌药有部分交叉耐药 性。林可霉素可能导致肝脏损害、过敏反应和心血管反应,经 动物代谢后,可能残留于组织样本中。 本试剂盒是应用 ELISA 技术研发的药物残留检测产品, 与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点, 能限度地减少工作强度和操作误差。
实验原理
本试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法,在酶标板微孔条上 预包被林可霉素抗原,样本中林可霉素和此抗原竞争林可霉素 抗体(抗试剂),同时林可霉素抗体与酶标二抗(酶标物)相 结合,经 TMB 底物显色,样本的吸光度值与林可霉素的含量 呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得 出样本中林可霉素的含量。
适用范围
可定性、定量检测畜禽、水产类动物组织中林可霉素的含量。
样本前处理步骤
请参考说明书,不同样本,步骤不同
检测步骤
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平 衡 30min 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿 冷冻。
3、洗涤液在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标 准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加入标准品或样本 50μL 到对应的微孔中, 再加入林可霉素酶标物 50μL/孔,最后加入林可霉素抗试 剂 50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避 光环境中反应 30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液 250μL/ 孔,充分洗涤 4~5 次,每次间隔 10s,在吸水纸上拍干(拍 干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、显色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加入底物液 B 液 50μL/ 孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中 反应 15min。
8、测定:加入终止液 50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪 于 450nm 处(建议用双波长 450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据),测定每孔 OD 值 (若无酶标仪,则不加终 止液用目测法可进行判定)。
结果判定
请使用专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、 快速分析(欢迎来电索取)。